Современные проблемы экологии — причина бесплодия.
Антитела являются одним из наиболее важных реагентов при определении антигенов методом иммуноанализа. Антитела могут быть
1) поли- или моноклональными;
2) различного типа (IgG или IgM) и подтипа (IgGl, IgG2a);
3) моно-, би- или поливалентными;
4) моно- или биспецифическими;
5) антиаллатипическими или антиидиотипическими;
6) нативными или полученными химическим или генно-инженерным путем;
7) мечеными или связанными тем или иным способом с твердой фазой.
Провести ремонт крот профессионально. — причина бесплодия. Поликлональная антисыворотка может содержать до 10 000 различных типов молекул IgG. Напротив, все молекулы монокло-нальных антител должны быть идентичными. Моноклональные антитела предпочтительнее в методах конкурентного иммуноанализа, поскольку в этом случае можно утверждать, что меченый или связанный с твердой фазой антиген и определяемое вещество конкурируют за один и тот же центр связывания. Моноклональные антитела очень хорошо работают в «сандвич»-анализе, поскольку, как правило, хорошо известна специфичность их эпитопов. Такие антитела легко получать в больших количествах и с высокой степенью чистоты. Большинство нативных антител бивалентны, и все они моноспецифичны. Недавно с помощью гибридных гибридом и методов генной инженерии получены новые типы антител. Антитела могут быть мечеными или связанными с твердой фазой с помощью пассивной адсорбции или за счет ковалентных связей. Исследования мочи ежедневно — анализ мочи для определения беременности. На ранних этапах развития иммуноанализа предпочтение отдавалось жидкофазным методикам, в которых связавшиеся антитела осаждали (например, с помощью вторичных антител) или несвязавшийся антиген удаляли адсорбцией с помощью активированного угля, покрытого декстраном (твердофазный реагент). В настоящее время наиболее распространены твердофазные методики, поскольку они позволяют существенно упростить проведение анализа и уменьшить фоновый сигнал. Предлагались следующие типы носителей: 1) трубки (например, стеклянные, полистирольные, полипропиленовые) ; 2) гранулы (например, активированного полистирола); 3) мелкие частицы (например, полиакриламида, целлюлозы, сефарозы); 4) микропланшеты или полоски (например, полистирольные); 5) дипстики, карточки, стержни (например, полистирольные); 6) электроды (например, платиновые, углеродные); 7) пленки или волокна (например, стеклянные, кварцевые). Если система включает электрод, то ее можно назвать био- или иммуносенсором. В качестве меток для контроля реакции антиген — антитело рекомендовались: 1) частицы (например, эритроциты, латексы); 2) золи металлов и красителей (например, золото, Palanil® Luminous Red G); 3) радионуклиды (например, иод-125, тритий); 4) ферменты, субстраты, кофакторы; . 5) потенциальные люминофоры (например, производные изо-люминола, эфиры акридина); 6) электрохимически активные соединения (например, диме-тиламинометил ферроцен). Люминесценция — это процесс излучения света веществом, находящимся в электронно-возбужденном состоянии. В зависимости от источника энергии, необходимой для перевода электронов в возбужденное состояние, различают несколько типов люминесценции, а именно: 1) радиолюминесценция, 2) фотолюминесценция — флуоресценция и фосфоресценция, 3) хемилюминесценция и биолюминесценция, 4) термохемилюминесценция, 5) электрохемилюминесценция, 6) сонохемилюминесценция. Возможны и другие сочетания (фототермолюминесценция, электротермолюминесценция и т. д.). Иногда, например при флуоресценции и электролюминесценции, одна и та же молекула может последовательно испускать несколько фотонов. Одни метки предпочтительнее при проведении анализов вне лаборатории, другие дают лучшие результаты в высокочувствительных анализах, чувствительность которых зависит от удельной активности реагента и отношения сигнал /шум. Тип метки часто используется наряду с основным принципом при описании и классификации методов иммуноанализа (радиоиммуноанализ, иммуно-радиометрический анализ, иммуноферментный анализ, ферментативный иммунометрический анализ и т. д.). Кроме того, в описании может быть указано и использование твердой фазы, например твердофазного иммуноферментного анализа ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay). Меченый реагент иногда называют биозондом. Для определения меченых соединений и комплексов можно применять различные методы: 1) оптические: фотометрические, включая нефелометрические (для мечных соединений и продуктов); фотоэмиссионные, в том числе измерение — флуоресценции (поляризационной и с временным разрешением) ; — фосфоресценции; — хемилюминесценции (со свечением более 180 с и импульсной со свечением менее 20 с); измерение рассеяния и отражения фотонов частицами в растворе и реагентами на поверхностях; 2) электрические: потенциометрические; амперометрнческие; 3) термические: калориметрические; 4) акустические: сонометрические. На завершающем этапе иммуноанализа величина сигнала от метки может быть выражена в виде ее общего количества или в виде концентрации. Кроме того, непосредственно определяемой величиной может быть скорость реакции. Способ регистрации также можно использовать для классификации методов иммуноанализа (оптический иммуноанализ, амперометрический иммуноанализ и т. д.). Кроме того, методы иммуноанализа можно классифицировать по способу осуществления: 1) жидкофазные или твердофазные, 2) ручные, полуавтоматические или автоматические, 3) с разделением (гетерогенные) или без разделения (гомогенные), 4) с экстракцией или без экстракции. Жидкофазные или твердофазные методы могут быть ручными, полуавтоматическими с частичным участием оператора или полностью автоматическими (после завершения операций подготовки пробы). Кроме того, они могут включать или не включать стадию разделения свободного и связанного с антителами определяемого вещества. Наконец, исследуемое вещество можно определять или после выделения, или непосредственно в исходном образце. Долю не связанных с белками (т.е. кажущихся свободными) гаптенов можно оценить непосредственно. Дальнейшее развитие методик иммуноанализа необходимо для решения следующих задач: 1) расширения круга определяемых соединений; 2) повышения чувствительности (например, при определении вирусных и бактериальных антигенов и опухолевых маркеров); 3) расширения рабочего диапазона концентраций (что позволит обходиться без разбавления проб); 4) сокращения времени проведения анализа; 5) развития внелабораторных й домашних диагностикумов; 6) разработки методик одновременного определения нескольких веществ или объектов, например для оценки гормональных и бактериальных профилей; 7) производства реагентов и наборов с большим сроком хранения в неблагоприятных условиях; 8) государственной и межгосударственной стандартизации.
